የዲ ኤን ኤ ውህደትን ውጤታማነት የሚወስኑ ምክንያቶች

በተለመደው ዲ ኤን ኤ፣ አር ኤን ኤ እና ተፈጥሯዊ ባልሆኑ ኑክሊክ አሲዶች ውህደት ውስጥ የመከላከል እና የማጣመር እርምጃ ወሳኝ ሚናዎችን ይጫወታል።

የመከላከያ እርምጃው የዲኤምቲ ቡድንን በጠንካራ ድጋፍ ላይ ወይም 5' ሃይድሮክሳይል ቡድንን በቀድሞው ኑክሊዮሳይድ ላይ ከኦርጋኒክ አሲድ ጋር ማስወገድ እና የሃይድሮክሳይል ቡድንን ለሚከተለው የማጣመር እርምጃ ማጋለጥ ነው።በ dichloromethane ወይም toluene ውስጥ ያለው 3% trichloroacetic acid በአብዛኛው ጥቅም ላይ የሚውለው የመከላከያ እርምጃን ለማከናወን ነው።የትሪክሎሮአክቲክ አሲድ ክምችት እና የመከላከያ ጊዜ (የማገድ ጊዜ) የመጨረሻውን ምርቶች ንፅህና ይቆጣጠራል.ዝቅተኛ ትኩረት እና በቂ ያልሆነ የማገጃ ጊዜ ምላሽ ያልተገኘ የዲኤምቲ ቡድን ይተዋል ፣ ይህም ምርቱን ይቀንሳል እና የማይፈለጉትን ቆሻሻዎች ይጨምራል።የረዥም ጊዜ ማገጃ ጊዜ ያልተጠበቁ ቆሻሻዎችን በመፍጠር የተቀናጁ ቅደም ተከተሎችን መጥፋትን ሊመራ ይችላል።

የማጣመጃው ደረጃ ለሟሟት የውሃ ይዘት እና በአየር ውስጥ ላለው እርጥበት ስሜታዊ ነው።በውህደቱ ውስጥ ያለው የውሃ መጠን ከ 40 ፒፒኤም ያነሰ, ከ 25 ፒፒኤም ያነሰ መሆን አለበት.የ anhydrous ውህድ ሁኔታን ለመጠበቅ የኑክሊክ አሲዶች ውህደት ዝቅተኛ እርጥበት ባለው አካባቢ ውስጥ መከናወን አለበት ፣ ስለሆነም ደንበኞቻችን እንዲጠቀሙ እንመክራለን ።አሚዳይትስ የተሟሟ መሳሪያዎች, ከአየር ጋር ንክኪን ለማስቀረት በዱቄት ወይም በቅባት ፎስፎራሚዳይት ውስጥ በ anhydrous acetonitrile ውስጥ ሊሟሟ ይችላል።

የዲኤንኤ ውህደትን ውጤታማነት የሚወስኑ ምክንያቶች5
የዲኤንኤ ውህደትን ውጤታማነት የሚወስኑ ምክንያቶች4

የ phosphoramidites የሚሟሟ ውኃ ያልሆኑ ሁኔታዎች ላይ የተሻለ ነው, እና ሞለኪውላዊ ወጥመዶች reagents እና amidite ውስጥ መከታተያ ውኃ adsorb, ይህ ማዘጋጀት ያስፈልገዋል.ሞለኪውላዊ ወጥመዶች.ለ 50-250ml reagent ጠርሙሶች 2 g subsieve, 5g ለ 250-500ml reagent ጠርሙሶች, 10g ለ 500-1000ml ጠርሙሶች እና 20 ግራም ለ 1000-2000ml ጠርሙሶች እንመክራለን.

የ phosphoramidites መሟሟት በከባቢ አየር ውስጥ መከናወን አለበት ፣ እና የአክቲቫተር ሬጀንቶች እና አሴቶኒትሪል መተካት በጊዜ መጠናቀቅ አለበት።ካፒንግ እና ኦክሲዴሽን ሬጀንቶች በተቻለ ፍጥነት ጥቅም ላይ መዋል አለባቸው ፣ የተከፈቱት ሬጀንቶች የመቆያ ህይወትን እና በተዋሃዱ ጊዜ አነስተኛ እንቅስቃሴን ይሰጣሉ ።


የልጥፍ ጊዜ፡- ኦገስት-09-2022