የኒውክሊክ አሲድ ውህደት መርሆዎች

የኑክሊክ አሲድ ውህደት የሚካሄደው በጠንካራ ደረጃ የሳይሊክ አሚድ ትራይግሊሰርራይድ ዘዴ በመጠቀም ነው ፣ በዚህ ምክንያት የዲ ኤን ኤው 3′ ጫፍ በጠንካራ ደረጃ ንጣፍ ላይ የማይንቀሳቀስ እና ኑክሊዮታይድ በ 3′ እስከ 5′ አቅጣጫ ተጨምሯል የሚፈለገው የዲ ኤን ኤ ቁራጭ እስኪቀላቀል ድረስ። .ይህ በዲ ኤን ኤ ፖሊሜሬዜሽን በመተግበር ከዲኤንኤ ውህደት ይለያል.

የመጀመሪያው መሠረት 3′ መጨረሻ ሲፒጂ ሲዋሃድ ላይ የማይንቀሳቀስ ነው፣የቀጣዩ መሠረት 5′-OH በዲ-ፒ-ቶሊል ትሪቲል ዲኤምቲ የተጠበቀ ነው፣በመሠረቱ ላይ ያለው አሚኖ ቡድን በቤንዚክ አሲድ እና በ3′ የተጠበቀ ነው። - ኦኤች በአሚኖ ፎስፌት ውህድ እንዲነቃ ይደረጋል።1 የ 5 5 5'-OH የ 1 መሰረት እና 3'-OH የቀጣዩ መሰረት ፎስፌት ትራይግሊሰርራይድ ይመሰርታሉ, ከዚያም በአዮዲን ወደ ፎስፌት ትራይግሊሰርራይድ ይሰራጫሉ, በሁለተኛው መሠረት 5'-OH ላይ ያለው መከላከያ በ 5'-OH ይወገዳል. የዲክሎሮአክቲክ አሲድ ዲ ኤም ዑደቶችን በሚቀጥለው መሠረት በመጨመር እና ከተዋሃዱ በኋላ በ 5'-OH ላይ ያለው መከላከያ በደካማ አሲድ ይወገዳል ቁርጥራጩ ከጠንካራው ሙጫ ከአሞኒየም ሃይድሮክሳይድ ጋር ተለያይቷል ፣ ተከላካዩ ከመሠረቱ ይወገዳል በማሞቂያው ስር በተከማቸ አሞኒየም ሃይድሮክሳይድ ፣ አሚዮኒየም ሃይድሮክሳይድ ይወገዳል ፣ ቁርጥራሹ በቫኩም ይደርቃል ፣ እና ኑክሊክ አሲድ በፈሳሽ ክሮሞግራፊ ወይም ገጽ ይጸዳል።

የ Oligo Synthesis ደረጃዎች

ማገድ

የ5 መጨረሻ የዲኤምቲ መከላከያ ቡድን TCA መፍትሄ በመጨመር ይወገዳል.

ማግበር

ገቢር ኦሊጎኑክሊዮታይድ ሞኖሜርን ከኦሊጎኑክሊዮታይድ ሞኖመር ጋር በማዋሃድ የነቃውን ኦሊጎኑክሊዮታይድ ሞኖመር መካከለኛ መፍጠር።

መጋጠሚያ

ባለ 5-ተርሚናል ሃይድሮክሳይል ቡድን ከነቃ ኦሊጎኑክሊዮታይድ መካከለኛ ጋር በፀረ-ጀነሬቲቭ ኮንደንስሽን ምላሽ ምላሽ ይሰጣል ያልተረጋጋ የፎስፌት ትራይግሊሰርይድ ቦንድ ይመሰርታል።

ካፕ ማድረግ 

የካፒንግ ኤጀንት መጨመር በኮንደንስ ምላሽ ውስጥ ያልተሳተፉ ከመጠን በላይ የሃይድሮክሳይል ቡድኖች ጋር የአሲቴላይዜሽን ካፕ ምላሽን ያከናውናል.

ኦክሳይድ 

ውሃ የያዘው የአዮዲን መፍትሄ በኦክሳይድ ያልተረጋጋ የፎስፌት ቦንዶች ምላሽ በመስጠት የተረጋጋ የፎስፈሪክ አሲድ ትራይግሊሰርይድ ቦንድ ይፈጥራል።

ሲያኖኤቲል ክላቭጅ

ከተዋሃደ በኋላ የኑክሊክ አሲድ ምርት ፣ የሳይያኖኢቲል ቡድንን ከፎስፌት ትራይግሊሰሪድ ትስስር ለማስወገድ ከ DEA መፍትሄ ጋር።

የተሰነጠቀ&መከላከያ

የኑክሊክ አሲድ ቁርጥራጮች የተከማቸ የአሞኒየም ሃይድሮክሳይድ መፍትሄ በመጨመር ከጠንካራ ደረጃ ተሸካሚው ተሰንጥቀዋል እና ከዚያም መከላከያ ቡድኖችን ከመሠረቶቹ ሃይድሮጂን ቦንዶች ለማስወገድ ይሞቃሉ።